离子交流树脂在色谱疏散上的应用,除了在无机物的疏散上,也在如糖类、卵白质、氨基酸等有机酸类和碱土金属、重金属、稀土金属等的疏散上普遍应用。
一、树脂色谱疏散的原理:离子交流法是使用离子交流树脂(固体相)与溶液(液体相)中的离子之间所爆发的交流反应来举行疏散的要领。主要应用于微量组分的富集和高纯度物质的制备。树脂对离子的亲和力反应了离子在树脂上的交流能力,水合离子的半径越小,电荷越高,其亲和力也越大。将含有差别离子的溶液通过离子交流树脂,树脂将凭证对这些离子的差别亲和力,将其依此吸附在树脂的基团上(这现实相似于水处置惩罚上的离子层态漫衍图)。然后,选用差别的洗脱液,依次将这些吸附物洗脱下来,通过对洗脱液的剖析,选取差别时间段的物质因素加以接纳的历程。
而对有机物质的提取和疏散中,则主要是依赖树脂的极性、孔径、比外貌积、粒度等物理因素,对有机混淆物中差别的因素按其分子量的巨细将其依此顺次的吸附在树脂上,饱和后,再通过差别的溶剂,依此将其剖析并分段予以接纳和浓缩的历程。
二、色谱疏散的焦点构件是色谱柱,而其中的填料的优劣(牢靠相)又是色谱柱的焦点。色谱柱的填料种类繁多,有硅胶,聚合树脂等,现在用树脂作填料的越来越多。使用填料的选择主要取决于样品的疏散模式。
三、决议色谱柱的性能优劣主要由以下几方面:
1、填料树脂自己的质量问题,这主要包括它的理化性能指标方面。
2、色谱柱的高径比。高径比越大,则疏散的效果越佳,但运行的阻力也相对较大。高径比以4:1较佳。
3、过料的质量有关。料液的温度对色普的影响有一定的关系。
4、洗脱液的选择和浓度的崎岖对洗脱的效果也有一定的影响。因此,对一种混淆物的色谱疏散,何种工艺是最佳的,有须要通过一定的试验,探索出最佳的运行工况。
四、现以我公司的DTF-01色谱树脂在低聚糖和葡萄糖上的色谱疏散使用要领先容如下:
DTF-01色谱树脂在使用前都要经由预处置惩罚(若是直接呈使用态Rca型则直接纯水冲洗后使用),使树脂在使用时抵达正常的状态。预处置惩罚的办法为:
1、树脂装柱后,用纯水浸泡,使树脂充分吸水膨胀,然后,举行反洗,控制适当(80-100%)的膨胀率,以去除细小的树脂颗粒和可能的杂物,直到反洗出水澄清、无色、无泡沫止;
2、通入1mol/l的HCl溶液,当出口浓度达0.5mol/l时,浸泡树脂24小时,然后用纯水冲洗到中性;
3、通入约0.5mol/l的NaOH溶液,当出口浓度抵达0.3 mol/l时,浸泡24小时,然后用纯水冲洗到中性;
4、转型:通入约3BV-4BV的l mol/lCaCl2溶液使树脂彻底转为R2Ca型(若出厂是R2Ca型则只需反洗、洗濯即可),并且浸泡12小时以上,然后用纯水洗到中性备用。
五、色谱疏散操作:一定温度(70℃)下的料液,以一定的流速通过树脂柱(或说色谱柱),当糖液完全进入色谱柱,并使色谱柱饱和后(或出口有一定浓度的糖液),用统一流速的纯水对树脂举行洗脱,并在树脂柱的出口端网络洗脱液,并实时取样剖析糖的因素和浓度。
疏散效果:在70℃,洗脱流速5.6m/h,DTF-01树脂的疏散效果为:在疏散液网络的最先阶段低聚糖的含量高达92%,而葡萄糖的含量只有1.6%。随着时间的推移,低聚糖的流出量逐渐镌汰,并且浓度转变较快。
试验效果批注:接纳我公司的DTF-01树脂,对发酵法制造的低聚糖举行疏散提纯能够获得很好的效果。低聚糖中大部分的葡萄糖因素可以被去除,使低聚糖含量由60%提高到90%以上,葡萄糖的含量少于2%。
同样DTF系列色谱疏散树脂对葡萄糖和果糖的疏散以及在中草药的提纯疏散上也有成熟优异的疏散效果。另外,统一种树脂呈差别的离子形态,其功效也有所差别如:
钙型:果糖/葡萄糖;山梨糖醇/甘露糖醇;甘露糖/右旋糖;半乳糖/葡萄糖
钠型或钾型:右旋糖/聚合物;麦芽糖/聚合物;
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